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磁分离酶联免疫测定技术在甲状腺激素测定中的应用价值

时间:2017-12-13 12:00:10来源:www.xielunwen.net 作者:admin 点击: 47 次
【摘要】引进加拿大BiochemImmunosystems公司的磁分离酶联免疫技术(MAIA)做甲状腺激素测定,灵敏度可达1×10=12g检测级。经一年的实验,本文认为MAIA是一种灵敏、快速、特异性强、重复性好、显色稳定的试验。本文用来自内蒙古各地的153名健康人做正常参考值测定,与上海和网外正常参考值比较,结果发现:内蒙地区男、女甲状腺激素水平与上海地区比较有显着差异,P<
【摘要】  引进加拿大Biochem Immunosystems公司的磁分离酶联免疫技术(MAIA)做甲状腺激素测定,灵敏度可达1×10=12g检测级。经一年的实验,本文认为MAIA是一种灵敏、快速、特异性强、重复性好、显色稳定的试验。本文用来自内蒙古各地的153名健康人做正常参考值测定,与上海和网外正常参考值比较,结果发现:内蒙地区男、女甲状腺激素水平与上海地区比较有显着差异,P<0.01,促甲状腺激素(TSH)无差异。内蒙地区与国外正常参考值比较除总T3无差异外,P>0.05,其余均有显著性差异,P<0.01。用上海地区正常参考值,判定328名患者甲状腺激素结果异常,而套用内蒙地区正常参考值,328名中只有161名甲状腺激素异常,167名结果正常。
本文又对可能影响MAIA试验的因素:高血脂、高血糖、高血红蛋白血清做了交互影响试验,结果:甘油三酯达3.23mmol/L时,对试验有影响,F=11.65,血清中血糖20mmol/L,血红蛋白达13g/L,对试验无影响。
【关键词】  磁分离   酶联免疫   甲状腺激素
        测定甲状腺激素的方法很多,如放射免疫,酶标免疫,但他们都有这样或那样的缺点和不足。如:使用同位素标记,具有放射危害,对环境污染,试剂含有致癌物质,试剂有效期短,不适合中小医院。磁分离酶联免疫技术(MAIA)是80年代中期瑞士史洛诺(Serono)诊断中心发明的一项高灵敏度的酶免技术,该技术中的“免疫磁性微粒”是医学生物学领域分离材料方面的一项重大科技成果,是对微量生物活性物质分离纯化的关键材料。它具有灵敏、快速、特异性强、重复性好、无放射致癌物质、试剂有效期长的优点。与放射免疫法比较,两法结果符合率达92.72%,呈高度相关,(r=0.974,P<0.0001),用MAIA测甲状腺激素在自治区尚属首家, Biochem immunosystems公司试剂盒中带有国外的正常参考值,他们又委托上海市第一人民医院做了国内的正常参考值,但在实验中,我们发现:(1)甲状腺激素水平与上述两地有很大差异,容易给临床医生造成误导。(2)血清中脂类高会影响试验结果。那么高糖、高血红蛋白血清是否也会影响试验结果呢?我们采用正交设计,对三种影响因素进行交互影响试验。本文意在对MAIA在甲状腺激素测定中的应用价值做一些探讨,使MAIA这一高新技术在内蒙地区得到推广。
        1  实验原理
        待测抗原在匀相状态中与酶抗体和荧光素抗体结合,然后加入已预先标记了抗荧光素抗体的磁性微粒。(大量的1μm大小的磁性微粒在匀相状态接触面积大大高于酶标,放免中使用聚乙烯板、聚乙烯管)标本中的抗原与酶标抗体,荧光素抗体,抗荧光素抗体,磁性微粒形成聚合物。在磁场的作用下,聚合物被沉淀,未结合的物质被洗去。加入底物显桃红色后,在 SEROZYME-I型磁分离酶联免疫内分泌定量测定仪上采用三波长同时检测(目的是消除干扰因素,拓展测量范围),然后读取结果。
        2  材料和方法
        2.1仪器
        SEROZYME-I型磁分离酶联免疫内分泌定量测定仪,三波长,软件可储存标准曲线,自动拟合最佳曲线,自动计算并打印浓度值。磁分离器(专用试管架,底部为永久性磁板),混匀器。
        2.2试剂
        加拿大Biochem immunosystems公司进口T3、T4、FT3、TF4、TSH试剂盒,有效期六个月。
        2.3调查对象
        (1)来自全区各地健康体检者,经实验室检查,肝功、血脂、血糖、血常规、尿常规正常者。共153人,其中男性77人,女性76人,年龄18~70岁。清晨空腹抽血,分离血清,-18℃保存,分析前一次复融,充分摇匀使用。
        (2)将正常人血清测TG、GUL、HB,分别记为A1、B1、C1水平。另用正常人血清配高TG、GUL、HB,分别记为A2、B2、C2水平。A2、TG:3.23mmol/L,B2、GUL:20mmol/L,C2、HB:13g/L。 (责任编辑:admin)
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